Mục tiêu: Xây dựng phương pháp xác định hoạt lực enzyme Nattokinase trong thực phẩm bảo vệ sức khoẻ bằng quang phố hấp thụ phân tử (UV-VIS). 

Phương pháp: Hoạt lực enzyme Nattokinase trong mẫu thử được xác định gián tiếp thông qua việc ước tính dịch thuỷ phân của nó. Sau phản ứng tiêu sợi huyết, sản phẩm thuỷ phân hoà tan của Nattokinase được đo ở bước sóng 275 nm. 

Kết quả: Các điều kiện tối ưu của quá trình chiết tách đã được khảo sát, phản ứng được tiến hành ở pH 8,5, nhiệt độ phản ứng là 37°C và thời gian phản ứng là 60 phút. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) của phương pháp lần lượt là 4,4 (FU/g) và 14,8 (FU/g). Độ lặp lại (RSDr) và độ tái lặp nội bộ (RSD_R) của phương pháp nằm trong khoảng từ 1,9 đến 5,4%. Phương pháp được ứng dụng để xác định hoạt lực enzyme Nattokinase trong 10 mẫu thực phẩm bảo vệ sức khoẻ thu thập tại Hà Nội, kết quả phân tích cho thấy hoạt lực enzyme Nattokinase trong 10 mẫu nằm trong khoảng từ 77,0 đến 96,2% so với giá trị công bố trên nhãn sản phẩm. 

Kết luận: Các thông số thẩm định của phương pháp đạt yêu cẩu theo Hiệp hội hợp tác phân tích chính thống (AOAC). Phương pháp sử dụng thiết bị đơn giản, kết quả thẩm định có độ tin cậy cao do vậy có thể sử dụng để nghiên cứu sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khoẻ chứa enzyme Nattokinase cũng như kiểm soát chất lượng của các loại thực phẩm bảo vệ sức khoẻ trên thị trường. 

Aims: To development of method for determination of nattokinase activity in dietary supplements by ultraviolet spectrophotometry. 

Methods: Nattokinase activity determination indirectly through the estimation of its hydrolysate.  After the fibrinolytic reaction, the soluble hydrolysate products of Nattokinase are measured at 275 nm. 

Results: The optimal conditions of the extraction process were investigated, the reaction was carried out at pH 8.5, the reaction temperature was 37°C and the reaction time was 60 minutes. The limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) of the method were 4.4 (FU/g) and 14.8 (FU/g), respectively. The repeatability (RSDr) and internal reproducibility (RSD_R) of the method ranged from 1.9 to 5.4%. The method was applied to determine the activity of Nattokinase enzyme in 10 dietary supplement samples collected in Hanoi. The analysis results showed that the activity of Nattokinase enzyme in 10 samples ranged from 77.0 to 96.2% compared to the value declared on the product label.

Conclusion: The validated parameters have met the requirement of Association of Official Analytical Collaboration (AOAC). The method uses simple equipment, the validation results are highly reliable, so it can be used to research the production of dietary supplement containing Nattokinase enzyme as well as control the quality of dietary supplement on the market.